TD et TP n 1 immuno : Université d'oran

Le sang est constitué de cellules spéciales en suspension dans un liquide appelé plasma. Le sang représente environ 1/12 de la masse corporelle d'un homme adulte, ce qui correspond à de 5 à 6 litres de liquide. Il est constitué à 55 % de plasma et à 45 % de cellules appelées éléments figurés.
Lorsqu'on prélève un échantillon de sang, on peut séparer les cellules du plasma en centrifugeant le sang total. (Il faut ajouter un anticoagulant pour éviter que le sang ne coagule.)


Le plasma est composé principalement d'eau (92%), mais le plasma contient également des protéines (7%) et d'autres solutés (par exemple: nutrimentset vitamines. Parmi les protéines que l'on trouve dans le plasma, il y aurait par exemple l'albumine ou les immunoglobulines (anticorps). Il y a également des gaz dissous dans le plasma, notament le CO2 et l'O2.
Dans le plasma, on retrouvera aussi les nutriments (monomères issus de la digestion des aliments), ce sont notamment les acides aminés (après digestion des protéines), des glycérols et acides gras (après digestion des lipides), du glucose, ...

Cellules sanguines

Trois types de cellules sont en suspension dans le plasma sanguin: les globules rouges (érythrocytes), dont la fonction consiste à transporter le dioxygène; les globules blancs (leucocytes), qui constituent un des moyens de défense de l'organisme; et les plaquettes, qui jouent un rôle dans la coagulation du sang.

ERYTHROCYTES (globules rouges)


Les érythrocytes sont les cellules sanguines les plus nombreuses, à raison de 4 à 6 millions d'entre elles par mm3. Ils sont aussi appelés « globules rouges » ou « hématies ». Chez les humains comme chez tous les mammifères, les érythrocytes sont dépourvus de noyau et prennent la forme d'une lentille biconcave. Chez les autres vertébrés (p. ex., poissons, amphibiens, reptiles et oiseaux), ils ont un noyau.


LES PLAQUETTES

La fonction principale des plaquettes, ou thrombocytes, est de faire cesser l'écoulement du sang par les plaies (hémostase).
Même si les plaquettes sont en apparence plutôt rondes, ce ne sont pas de véritables cellules. Dans les frottis colorés au Giemsa, elles prennent une couleur pourpre intense. En raison de leur diamètre d'environ 2-3 µm, elles sont beaucoup plus petites que les érythrocytes. Leur densité dans le sang est de 200 000 à 300 000/mm3.


LEUCOCYTES (globules blancs)
Contrairement aux globules rouges, les leucocytes ont un noyau.
Habituellement, la forme du noyau des différents types de leucocytes est variable. la forme du noyau nous aide à reconnaître ces cellules.
Il existe 3 types de globules blancs : les polynucléaires, les lymphocytes et les monocytes.
Leur nombre est compris entre 4 000 et 10 000/ mm3.

Les granulocytes  neutrophiles

phagocytent très activement les bactéries et sont présents en nombre élevé dans le pus des plaies. Malheureusement, ces cellules sont incapables de renouveler les lysosomes utilisés dans la digestion des microbes et meurent après en avoir phagocyté quelques-uns.
 Diamètre : 12 -15 µm
 Noyau : polylobé (3 ou  4 lobes en général)
 On a donc un noyau unique mais segmenté. En microscopie optique, on a des granulations beiges, très peu colorées.


Les granulations neutrophiles sont les granules spécifiques de ce polynucléaire et ces granules  vont contenir des  produits  antibactériens  comme par exemple le lysozyme ou  des défensines.

A côté de ces granulations neutrophiles, on peu trouver  des granulations azurophiles, encore appelées granulations  primaires, Les granulations primaires correspondent en gros à des  lysosomes.

- faire glisser la lame inclinée vers l’extrémité libre de la lame support : le frottis doit être régulier, d’une longueur équivalente au 2/3 de la longueur de la lame, pas trop épais,




-Coloration MGG de l’étalement mince :

-Placer la lame sur un support horizontal situé au-dessus d’un bac de coloration.
-Mettre le colorant May-Grünwald pur de façon à recouvrir complètement le frottis. Laisser agir 3 minutes.
-Rincer la lame avec de l’eau.
-Plonger la lame dans un bain de Giemsa dilué au 1/10ième durant 20 minutes (Giemsa lent).
-Rincer la lame avec de l’eau.
-Laisser sécher la lame à l’air en position inclinée.
-Observer le frottis coloré à l’objectif 100.


bibliographie:
Le frottis de sang normal :Présentation de Rémi Moreda Académie de Montpellier.

CELLULES SANGUINES : Par Daniela Tagliasacchi et Giorgio Carboni, avril 1997 Illustrations de Michele Pirazzini

fattoum a écrit:

et pour l'hématopoïèse svp

L'hématopoïèse
Définition : L'hématopoïèse est l'ensemble des phénomènes qui concourent à la fabrication et au remplacement continu et régulé des cellules sanguines.


Besoins : Les cellules sanguines sont pour la plupart d'entre elles très différenciées, éléments terminaux et fonctionnels de lignées. Elles n'ont pas ou peu de possibilités de synthèse protéique et de division cellulaire (les hématies et les plaquettes n'ont pas de noyau). Leur durée de vie est courte : quelques heures pour les polynucléaires, quelques jours pour les plaquettes, quelques semaines pour les hématies. Cependant leur nombre est très élevé comme le montre les résultats d'un hémogramme.

L'hématopoïèse assure donc une production quantitativement très importante: chaque jour elle produit environ 10xp13 cellules sanguines. Ceci correspond par exemple à la production de plus de 2 millions d'hématies par seconde.



Cette considérable activité de production est assurée par une petite population de cellules de la moelle osseuse appelées cellules souches hématopoïétiques. Elle doit de plus être contrôlée afin de maintenir à peu près constant le nombre de cellules sanguines malgré des variations de consommation importantes liées à des circonstances pathologiques (hémorragies, infections ...). Cette régulation repose sur des mécanismes cellulaires et humoraux (facteurs de croissance) qui peuvent être stimulateurs ou inhibiteurs de l'hématopoïèse.

Sièges : Le siège de l'hématopoièse varie :



L'hématopoïèse foetale lors de la vie intra-utérine :

s'effectue au niveau du tissu conjonctif embryonnaire jusqu'au 2° mois.
est hépatique et splénique du 2° au 6° mois.
devient médullaire à partir du 4° mois et coïncide avec le développement des ébauches osseuses.

* Après la naissance l'hématopoïèse normale est localisée exclusivement dans la moelle osseuse. Jusque l'âge de 5 ans tous les os ont une activité hématopoïétique. Ensuite cette activité va progressivement se limiter au niveau des os courts et plats (sternum, cotes, vertèbres, os iliaques).


Les compartiments de l'hématopoïèse :
Toutes les cellules sanguines (hématies, polynucléaires, monocytes, lymphocytes et plaquettes) sont produites à partir d'une même cellule indifférenciée dite cellule souche multipotente ou cellule souche primitive.

Sous l'influence de facteurs stimulants une cellule souche multipotente va s'engager dans la différenciation d'une lignée cellulaire. Elle devient alors un progéniteur (= cellule souche différenciée ou " engagée ").

Après plusieurs divisions qui aboutissent à des cellules souches engagées à la potentialisation de différenciation de plus en plus limitée, les progéniteurs deviennent spécifiques d'une seule lignée. On aboutit alors aux précurseurs, cellules identifiables morphologiquement sur un prélèvement de moelle osseuse. Ces précurseurs se divisent et maturent.
La maturation terminale aboutit aux cellules matures fonctionnelles qui passent dans le sang.

L'hématopoïèse comporte donc 4 compartiments:

o Les cellules souches multipotentes
o Les progéniteurs
o Les précurseurs
o Les cellules matures

Les cellules souches primitives :


1 - Propriétés:

Les cellules souches ont deux propriétés essentielles: la capacité d'auto-renouvellement et la capacité de différenciation:

o Autorenouvellement = multiplication sans différenciation permettant de maintenir intact un pool de cellules souches primitives et donc le potentiel de l'hématopoïèse.

o Différenciation = possibilité, sous l'influence de facteurs de croissance, de se diviser en s'engageant de façon irréversible vers plusieurs ou une lignée. La cellule perd alors sa multipotence pour devenir une cellule souche engagée.

Lors d'une hématopoïèse normale il existe un équilibre entre la production des cellules souches par division cellulaire (autorenouvellement) et la perte des cellules souches par engagement vers les lignées cellulaires (différenciation).



Les progéniteurs :


La première différenciation d'une cellule souche multipotente après sa mise en cycle se fait vers la lignée lymphoïde ou vers la lignée myéloïde.


La cellule souche lymphoïde possède la potentialité de différenciation vers les deux types de lymphocytes (T et B).

La cellule souche myéloïde est appelée CFU-GEMM. Chaque nom de progéniteur est définie par l'association du préfixe CFU ("Colony Forming Unit") suivi de(s) lettre(s) qui caractérisent les lignées dont elle garde le potentiel de différenciation (GEMM = Granuleuse, Erythrocytaire, Macrophage et Mégacaryocytaire). Cette cellule va poursuivre son programme de différenciation et donner naissance à des progéniteurs encore plus engagés:


Nom de la cellule, Potentialité, Cellule terminale : voir schéma de l'hématopoïèse

CFU-GM Granulo-Macrophagique -----> P. Neutrophiles et Monocytes
CFU-G Granuleuse -----> Poly. neutrophiles
CFU-M Macrophagique -----> Monocytes
CFU-MK Mégacacaryocytaire -----> Plaquettes
CFU-Eo Eosinophile -----> Poly. éosinophiles
CFU-B Basophile -----> Poly. basophiles
BFU-E (Burst Forming Unit)
Erythroïde -----> Hématies

Les précurseurs :

Les précurseurs hématopoïétiques sont les premières cellules morphologiquement identifiables de chaque lignée. Ce ne sont plus des cellules souches car elles ont perdus toute capacité d'autorenouvellement. Le compartiment des précurseurs a pour buts la multiplication et la maturation cellulaire. Les précurseurs les plus immatures sont les myéloblastes (--> polynucléaires), les proérythroblastes (--> hématies), les mégacaryoblastes (--> plaquettes), les lymphoblastes (--> lymphocytes) et les monoblastes (--> monocytes).


Les cellules matures :


L'ensemble de l'hématopoïèse a lieu dans la moelle osseuse. Seules les cellules terminales, matures et fonctionnelles, vont passer dans le sang : polynucléaires neutrophiles, éosinophiles et basophiles, hématies, plaquettes, lymphocytes et monocytes. Pour la plupart de ces cellules le sang ne représente qu'un lieu de passage et de transport entre leur lieu de production (la moelle) et le lieu de leurs fonctions (les tissus). Les lymphocytes et les monocytes seront de plus capables de nouvelles différenciations après leur séjour sanguin.




Bibliographie :
FMC, Faculté de Médecine de Tours
http://www.med.univ-tours.fr/fmc/